Regulación de la inducción de arginasa en leishmaniosis experimental murina y su papel en la infección in vitro e in vivo por leishmania ssp
En el presente trabajo se ha pretendido realizar un estudio en profundidad de la función de la enzima arginasa en el modelo experimental Leishmania-ratón. Para ello hemos utilizado dos cepas murinas que representan el paradigma de susceptibilidad (BALB/c) y resistencia (C57BL/6) al desarrollo de la...
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Formato: | text (thesis) |
Lenguaje: | spa |
Publicado: |
Universidad de Extremadura (España)
2003
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Acceso en línea: | https://dialnet.unirioja.es/servlet/oaites?codigo=284 |
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oai-TES00000001122016-04-13Regulación de la inducción de arginasa en leishmaniosis experimental murina y su papel en la infección in vitro e in vivo por leishmania sspIniesta Orozco, VirginiaEn el presente trabajo se ha pretendido realizar un estudio en profundidad de la función de la enzima arginasa en el modelo experimental Leishmania-ratón. Para ello hemos utilizado dos cepas murinas que representan el paradigma de susceptibilidad (BALB/c) y resistencia (C57BL/6) al desarrollo de la infección por estos parásitos. Basándonos en este objetivo fundamental, en primer lugar se llevaron a cabo una serie de estudios in vitro, en macrófagos diferenciados de la médula ósea y procedentes de ratones de ambas cepas. Una vez maduros, los macrófagos fueron sometidos a diferentes estados de activación mediante citoquinas de tipo Th1 y Th2, al objeto de dirigir de forma diferencial el metabolismo del aminoácido L-arginina hacia la inducción de la iNOS o arginasa, respectivamente. Los datos mostraron que de forma constitutiva, los macrófagos BALB/c presentan unos mayores niveles de expresión de arginasa que los C57BL/6, los cuales, por el contrario, produjeron mayor cantidad de nitritos por activación de la iNOS. Estos resultados se correlacionan con una mayor permisividad a la infección en la cepa susceptible que en la resistente en todos los ensayos. Cuando los macrófagos fueron activados con citoquinas tipo Th2, inductoras de arginasa, y posteriormente infectadas tanto con L. major como L. infantum, ambas cepas respondieron con un alto incremento de la proliferación parasitaria de forma dosisdependiente, siendo este aumento proporcional al de la actividad enzimática. De todas las citoquinas, la IL-4 fue la que proporcionó mayores niveles de inducción de arginasa y de replicación de los parásitos. Mediante la técnica inmunológica de Western Blotting se confirmó que la isoforma de arginasa inducida en macrófagos infectados y tratados con IL-4, IL-10 y TGF- ß es la arginasa I. El análisis semicuantitativo de las bandas reflejó, una vez más, la mayor eficacia de la IL-4 para la inducción de esta enzima. Nuestra hipótesis fundamental de que las poliaminas generadas por la actividad arginasaUniversidad de Extremadura (España)Corraliza Generelo, Inés María (Universidad de Extremadura)Gómez, L. C. (Universidad de Extremadura)2003text (thesis)application/pdfhttps://dialnet.unirioja.es/servlet/oaites?codigo=284(Tesis) ISBN 84-7723-608-9 spaLICENCIA DE USO: Los documentos a texto completo incluidos en Dialnet son de acceso libre y propiedad de sus autores y/o editores. Por tanto, cualquier acto de reproducción, distribución, comunicación pública y/o transformación total o parcial requiere el consentimiento expreso y escrito de aquéllos. Cualquier enlace al texto completo de estos documentos deberá hacerse a través de la URL oficial de éstos en Dialnet. Más información: https://dialnet.unirioja.es/info/derechosOAI | INTELLECTUAL PROPERTY RIGHTS STATEMENT: Full text documents hosted by Dialnet are protected by copyright and/or related rights. This digital object is accessible without charge, but its use is subject to the licensing conditions set by its authors or editors. Unless expressly stated otherwise in the licensing conditions, you are free to linking, browsing, printing and making a copy for your own personal purposes. All other acts of reproduction and communication to the public are subject to the licensing conditions expressed by editors and authors and require consent from them. Any link to this document should be made using its official URL in Dialnet. More info: https://dialnet.unirioja.es/info/derechosOAI |
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En el presente trabajo se ha pretendido realizar un estudio en profundidad de la función
de la enzima arginasa en el modelo experimental Leishmania-ratón. Para ello hemos
utilizado dos cepas murinas que representan el paradigma de susceptibilidad (BALB/c) y
resistencia (C57BL/6) al desarrollo de la infección por estos parásitos.
Basándonos en este objetivo fundamental, en primer lugar se llevaron a cabo una serie
de estudios in vitro, en macrófagos diferenciados de la médula ósea y procedentes de
ratones de ambas cepas. Una vez maduros, los macrófagos fueron sometidos a diferentes
estados de activación mediante citoquinas de tipo Th1 y Th2, al objeto de dirigir de forma
diferencial el metabolismo del aminoácido L-arginina hacia la inducción de la iNOS o
arginasa, respectivamente.
Los datos mostraron que de forma constitutiva, los macrófagos BALB/c presentan unos
mayores niveles de expresión de arginasa que los C57BL/6, los cuales, por el contrario,
produjeron mayor cantidad de nitritos por activación de la iNOS. Estos resultados se
correlacionan con una mayor permisividad a la infección en la cepa susceptible que en la
resistente en todos los ensayos.
Cuando los macrófagos fueron activados con citoquinas tipo Th2, inductoras de
arginasa, y posteriormente infectadas tanto con L. major como L. infantum, ambas cepas
respondieron con un alto incremento de la proliferación parasitaria de forma dosisdependiente,
siendo este aumento proporcional al de la actividad enzimática. De todas las
citoquinas, la IL-4 fue la que proporcionó mayores niveles de inducción de arginasa y de
replicación de los parásitos.
Mediante la técnica inmunológica de Western Blotting se confirmó que la isoforma de
arginasa inducida en macrófagos infectados y tratados con IL-4, IL-10 y TGF- ß es la
arginasa I. El análisis semicuantitativo de las bandas reflejó, una vez más, la mayor
eficacia de la IL-4 para la inducción de esta enzima.
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