Rendimiento de diferentes métodos de PCR en el diagnóstico molecular de las rickettsiosis humanas transmitidas por garrapatas
Las rickettsiosis constituyen un grupo heterogéneo de zoonosis, transmitidas por artrópodos vectores (garrapatas, pulgas, piojos y otros ácaros) y producidas por distintas especies del género Rickettsia. El diagnóstico de este tipo de infecciones es fundamentalmente clínico, si bien hacen falta prue...
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Universidad de La Rioja (España)
2012
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Acceso en línea: | https://dialnet.unirioja.es/servlet/oaites?codigo=40431 |
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oai-TES00000056862019-06-21Rendimiento de diferentes métodos de PCR en el diagnóstico molecular de las rickettsiosis humanas transmitidas por garrapatasSantibáñez Sáenz, SoniaLas rickettsiosis constituyen un grupo heterogéneo de zoonosis, transmitidas por artrópodos vectores (garrapatas, pulgas, piojos y otros ácaros) y producidas por distintas especies del género Rickettsia. El diagnóstico de este tipo de infecciones es fundamentalmente clínico, si bien hacen falta pruebas confirmatorias de laboratorio. El cultivo celular, las técnicas serológicas y la amplificación mediante PCR de diversos fragmentos de genes rickettsiales constituyen los métodos de diagnóstico microbiológico más utilizados. Hasta la fecha no se ha evaluado la eficiencia de ensayos de PCR que amplifican ADN de Rickettsia spp. en muestras clínicas. Nuestro objetivo fue determinar la sensibilidad y la utilidad para la identificación de especies de rickettsia de métodos de PCR que amplifican los genes ADNr 16S, htrA, gltA, ompA y ompB para el diagnóstico molecular de rickettsiosis. Para ello estudiamos 72 muestras (sangre con EDTA, biopsias de piel y garrapatas) de 52 pacientes con rickettsiosis en fase aguda y confimada por PCR. Se realizaron PCRs sencillas [ADNr 16S, gltA (extremo 5'), y htrA] y secuenciales (anidadas o semianidadas) [ompB, gltA (región central) y ompA]. La mayor sensibilidad con PCRs sencillas se obtuvo para gltA (extremo5'). En PCRs secuenciales, los resultados más sensibles se lograron utilizando ompB (83.3%). La mayor sensibilidad (100%) se obtuvo tras realizar tres PCRs secuenciales. De acuerdo a las características clínicas, la PCR de ompA fue la más útil para identificación de especies de rickettsia. Como conclusiones de este trabajo se puede decir que: los métodos de PCR son válidos para el diagnóstico de rickettiosis en fase aguda. Los tres ensayos de PCR secuenciales aquí estudiados (ompB, gltA y ompA) son herramientas útiles para el diagnóstico molecular de rickettiosis. La PCR de ompB es efectiva para un primer cribado, permitiendo detectar un alto porcentaje de muestras positivas. La PCR del gen ompA es la más fiable para implicar una especie de rickettsia en patología humana. No obstante, la epidemiología, los síntomas clínicos y el vector deben ser valorados para el diagnóstico de rickettsiosis.Universidad de La Rioja (España)Oteo Revuelta, José Antonio (Universidad de La Rioja)Portillo Barrio, Aránzazu (Universidad de La Rioja)2012text (thesis)application/pdfhttps://dialnet.unirioja.es/servlet/oaites?codigo=40431spaLICENCIA DE USO: Los documentos a texto completo incluidos en Dialnet son de acceso libre y propiedad de sus autores y/o editores. Por tanto, cualquier acto de reproducción, distribución, comunicación pública y/o transformación total o parcial requiere el consentimiento expreso y escrito de aquéllos. Cualquier enlace al texto completo de estos documentos deberá hacerse a través de la URL oficial de éstos en Dialnet. Más información: https://dialnet.unirioja.es/info/derechosOAI | INTELLECTUAL PROPERTY RIGHTS STATEMENT: Full text documents hosted by Dialnet are protected by copyright and/or related rights. This digital object is accessible without charge, but its use is subject to the licensing conditions set by its authors or editors. Unless expressly stated otherwise in the licensing conditions, you are free to linking, browsing, printing and making a copy for your own personal purposes. All other acts of reproduction and communication to the public are subject to the licensing conditions expressed by editors and authors and require consent from them. Any link to this document should be made using its official URL in Dialnet. More info: https://dialnet.unirioja.es/info/derechosOAI |
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Las rickettsiosis constituyen un grupo heterogéneo de zoonosis, transmitidas por artrópodos vectores (garrapatas, pulgas, piojos y otros ácaros) y producidas por distintas especies del género Rickettsia. El diagnóstico de este tipo de infecciones es fundamentalmente clínico, si bien hacen falta pruebas confirmatorias de laboratorio. El cultivo celular, las técnicas serológicas y la amplificación mediante PCR de diversos fragmentos de genes rickettsiales constituyen los métodos de diagnóstico microbiológico más utilizados. Hasta la fecha no se ha evaluado la eficiencia de ensayos de PCR que amplifican ADN de Rickettsia spp. en muestras clínicas. Nuestro objetivo fue determinar la sensibilidad y la utilidad para la identificación de especies de rickettsia de métodos de PCR que amplifican los genes ADNr 16S, htrA, gltA, ompA y ompB para el diagnóstico molecular de rickettsiosis. Para ello estudiamos 72 muestras (sangre con EDTA, biopsias de piel y garrapatas) de 52 pacientes con rickettsiosis en fase aguda y confimada por PCR. Se realizaron PCRs sencillas [ADNr 16S, gltA (extremo 5'), y htrA] y secuenciales (anidadas o semianidadas) [ompB, gltA (región central) y ompA]. La mayor sensibilidad con PCRs sencillas se obtuvo para gltA (extremo5'). En PCRs secuenciales, los resultados más sensibles se lograron utilizando ompB (83.3%). La mayor sensibilidad (100%) se obtuvo tras realizar tres PCRs secuenciales. De acuerdo a las características clínicas, la PCR de ompA fue la más útil para identificación de especies de rickettsia. Como conclusiones de este trabajo se puede decir que: los métodos de PCR son válidos para el diagnóstico de rickettiosis en fase aguda. Los tres ensayos de PCR secuenciales aquí estudiados (ompB, gltA y ompA) son herramientas útiles para el diagnóstico molecular de rickettiosis. La PCR de ompB es efectiva para un primer cribado, permitiendo detectar un alto porcentaje de muestras positivas. La PCR del gen ompA es la más fiable para implicar una especie de rickettsia en patología humana. No obstante, la epidemiología, los síntomas clínicos y el vector deben ser valorados para el diagnóstico de rickettsiosis. |
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