تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند

همان‌طور‌که تحقیقات گوناگون نشان داده‌اند، در سال‌های اخیر، میزان مرگ‌ومیر براثرِ سرطان رشد چشمگیری داشته است؛ به‌همین‌دلیل است که محققان درپیِ تولید داروهای جدید، به‌ویژه داروهایی با اثرات جانبی کمتر، هستند. برهمین‌اساس، آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند نیز یکی از بهترین اورتولوگ‌ها برای آنزیم ریبو...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autores principales: مهسا ضابطیان, محمد رضا نصیری, علی جوادمنش, شاهرخ قوتی
Formato: article
Lenguaje:FA
Publicado: Ferdowsi University of Mashhad 2021
Materias:
Acceso en línea:https://doaj.org/article/592047722a3a4cb7ae9c03f54501fe74
Etiquetas: Agregar Etiqueta
Sin Etiquetas, Sea el primero en etiquetar este registro!
id oai:doaj.org-article:592047722a3a4cb7ae9c03f54501fe74
record_format dspace
spelling oai:doaj.org-article:592047722a3a4cb7ae9c03f54501fe742021-11-20T05:31:55Zتولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند2008-31062423-400110.22067/ijasr.2020.38319.0https://doaj.org/article/592047722a3a4cb7ae9c03f54501fe742021-10-01T00:00:00Zhttps://ijasr.um.ac.ir/article_39328_746c072d3bcacafe76cccff506b47908.pdfhttps://doaj.org/toc/2008-3106https://doaj.org/toc/2423-4001همان‌طور‌که تحقیقات گوناگون نشان داده‌اند، در سال‌های اخیر، میزان مرگ‌ومیر براثرِ سرطان رشد چشمگیری داشته است؛ به‌همین‌دلیل است که محققان درپیِ تولید داروهای جدید، به‌ویژه داروهایی با اثرات جانبی کمتر، هستند. برهمین‌اساس، آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند نیز یکی از بهترین اورتولوگ‌ها برای آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاو است که آن را در القای مرگ سلول‌های سرطانی به‌کار می‌گیرند. آنزیم گوسفندی تنها در 4 اسیدآمینۀ A19S، K37Q، V46F و N103E با آنزیم گاوی تفاوت دارد. در مطالعۀ پیش‌رو، ابتدا شکل سه‌بعدی آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند پیش‌بینی و سپس از‌نظر پایداری بررسی شد. درادامه، مشخصات فیزیکوشیمیایی این آنزیم با برنامه پرات پارام نیز مورد بررسی قرار گرفت.  همچنین، با استفاده ازروش‌های بیوانفورماتیکی شبیه‌سازی و با‌توجه ‌به RMSF، RMSD و Gyration analyses میزان پایداری پروتئین نیز پیش‌بینی گردید. مطالعات آزمایشگاهی نیز از ‌قبیل بررسی فرار این آنزیم از RI، میزان مقاومت آن درمقابل پپسین، غلظت پروتئین تولیدی، قابلیت القای مرگ سلولی در سلول‌های سرطانی و نیز میزان فعالیت این آنزیم، انجام گرفت. نتایج این تحقیق نشان می‌دهد که آنزیم مدنظر پس از 22 ساعت انکوبه در مجاورت پپسین تا 90% دست‌نخورده باقی می‌مانَد. میزان غلظت پروتئین تولیدی نیز mg/ml 4.78 بود که با استفاده از روش برادفورد تخمین زده شد. در این مطالعه فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز طبیعی پانکراس گوسفند 558±22 U/mol برآورد شد. همان‌طورکه در تحقیقات گذشته نشان داده شده است، انواعِ RNaseA گاو و گوسفند نمی‌توانند وارد سلول شوند و درنتیجه هیچ‌گونه سمیت سلولی نشان نمی‌دهند، ولی در این مطالعه با استفاده از لیپوفکتامین، این آنزیم‌ها وارد سلول شدند و مرگ سلولی را به سلول‌های سرطانی Hella القا کردند. میزان زنده‌مانی سلول‌ها نیز به‌روش MTT assay  اندازه‌گیری شد. براساس این تحقیق، مشخص شد که آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفندی فعالیت آنزیمی و توکسیتی مشابهی با آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاوی دارد و برای استفاده به‌عنوان توکسین در تولید ایمونوتوکسین‌ها جانشین مناسبی است.مهسا ضابطیانمحمد رضا نصیریعلی جوادمنششاهرخ قوتیFerdowsi University of Mashhadarticleآنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفندبیوانفورماتیکسمیت سلولیفعالیت زیستیAnimal cultureSF1-1100FAپژوهشهای علوم دامی ایران, Vol 13, Iss 3, Pp 429-440 (2021)
institution DOAJ
collection DOAJ
language FA
topic آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
بیوانفورماتیک
سمیت سلولی
فعالیت زیستی
Animal culture
SF1-1100
spellingShingle آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
بیوانفورماتیک
سمیت سلولی
فعالیت زیستی
Animal culture
SF1-1100
مهسا ضابطیان
محمد رضا نصیری
علی جوادمنش
شاهرخ قوتی
تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
description همان‌طور‌که تحقیقات گوناگون نشان داده‌اند، در سال‌های اخیر، میزان مرگ‌ومیر براثرِ سرطان رشد چشمگیری داشته است؛ به‌همین‌دلیل است که محققان درپیِ تولید داروهای جدید، به‌ویژه داروهایی با اثرات جانبی کمتر، هستند. برهمین‌اساس، آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند نیز یکی از بهترین اورتولوگ‌ها برای آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاو است که آن را در القای مرگ سلول‌های سرطانی به‌کار می‌گیرند. آنزیم گوسفندی تنها در 4 اسیدآمینۀ A19S، K37Q، V46F و N103E با آنزیم گاوی تفاوت دارد. در مطالعۀ پیش‌رو، ابتدا شکل سه‌بعدی آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند پیش‌بینی و سپس از‌نظر پایداری بررسی شد. درادامه، مشخصات فیزیکوشیمیایی این آنزیم با برنامه پرات پارام نیز مورد بررسی قرار گرفت.  همچنین، با استفاده ازروش‌های بیوانفورماتیکی شبیه‌سازی و با‌توجه ‌به RMSF، RMSD و Gyration analyses میزان پایداری پروتئین نیز پیش‌بینی گردید. مطالعات آزمایشگاهی نیز از ‌قبیل بررسی فرار این آنزیم از RI، میزان مقاومت آن درمقابل پپسین، غلظت پروتئین تولیدی، قابلیت القای مرگ سلولی در سلول‌های سرطانی و نیز میزان فعالیت این آنزیم، انجام گرفت. نتایج این تحقیق نشان می‌دهد که آنزیم مدنظر پس از 22 ساعت انکوبه در مجاورت پپسین تا 90% دست‌نخورده باقی می‌مانَد. میزان غلظت پروتئین تولیدی نیز mg/ml 4.78 بود که با استفاده از روش برادفورد تخمین زده شد. در این مطالعه فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز طبیعی پانکراس گوسفند 558±22 U/mol برآورد شد. همان‌طورکه در تحقیقات گذشته نشان داده شده است، انواعِ RNaseA گاو و گوسفند نمی‌توانند وارد سلول شوند و درنتیجه هیچ‌گونه سمیت سلولی نشان نمی‌دهند، ولی در این مطالعه با استفاده از لیپوفکتامین، این آنزیم‌ها وارد سلول شدند و مرگ سلولی را به سلول‌های سرطانی Hella القا کردند. میزان زنده‌مانی سلول‌ها نیز به‌روش MTT assay  اندازه‌گیری شد. براساس این تحقیق، مشخص شد که آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گوسفندی فعالیت آنزیمی و توکسیتی مشابهی با آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاوی دارد و برای استفاده به‌عنوان توکسین در تولید ایمونوتوکسین‌ها جانشین مناسبی است.
format article
author مهسا ضابطیان
محمد رضا نصیری
علی جوادمنش
شاهرخ قوتی
author_facet مهسا ضابطیان
محمد رضا نصیری
علی جوادمنش
شاهرخ قوتی
author_sort مهسا ضابطیان
title تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
title_short تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
title_full تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
title_fullStr تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
title_full_unstemmed تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
title_sort تولید و بررسی ویژگیهای آنزیم نوترکیب ریبونوکلئاز پانکراس گوسفند
publisher Ferdowsi University of Mashhad
publishDate 2021
url https://doaj.org/article/592047722a3a4cb7ae9c03f54501fe74
work_keys_str_mv AT mhsạḍạbṭyạn twlydwbrrsywyzẖgyhạyậnzymnwtrḵybrybwnwḵlỷạzpạnḵrạsgwsfnd
AT mḥmdrḍạnṣyry twlydwbrrsywyzẖgyhạyậnzymnwtrḵybrybwnwḵlỷạzpạnḵrạsgwsfnd
AT ʿlyjwạdmnsẖ twlydwbrrsywyzẖgyhạyậnzymnwtrḵybrybwnwḵlỷạzpạnḵrạsgwsfnd
AT sẖạhrkẖqwty twlydwbrrsywyzẖgyhạyậnzymnwtrḵybrybwnwḵlỷạzpạnḵrạsgwsfnd
_version_ 1718419483105689600