Community participation and communication processes in the implementation of programs of resettlement of families within the context of urban development in the city of Barranquilla (Colombia)
Objetivo: Estandarizar una técnica de PCR para la detección de Chlamydia trachomatis . Materiales y método: Estudio experimental en el que se optimizaron las condiciones de PCR para la detección in vitro de C. trachomatis . Se utilizó ADN de C. trachomatis VR885D y los cebadores CtP1 5...
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| Autores principales: | , , |
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| Formato: | article |
| Lenguaje: | EN ES |
| Publicado: |
Universidad del Norte
2016
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | https://doaj.org/article/ca3015659c95466a81d919ff21df3f67 |
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| Sumario: | Objetivo: Estandarizar una técnica de PCR para la detección de Chlamydia trachomatis . Materiales y método: Estudio experimental en el que se optimizaron las condiciones de PCR para la detección in vitro de C. trachomatis . Se utilizó ADN de C. trachomatis VR885D y los cebadores CtP1 5 ́-TAGTAACTGCCACTTCATCA-3 ́ y CtP2 5 ́- TTCCCCTTGTAATTCGTTGC-3 , que amplificaron un segmento de 201 pb del plásmido clamidial. Se realizaron diluciones logarítmicas de ADN clamidial y fueron empleados para determinar la sensibilidad analítica expresada como copias de plásmidos y/o de cuerpos elementales. La especificidad analíti - ca de la prueba se evaluó usando los cebadores CtP1 y CtP2 y ADN de microorganismos colonizadores y/o patógenos urogenitales. La variabilidad intraensayo fue evaluada sobre muestras por triplicado, mientras que la variabilidad interensayo se determinó mediante comparación de los resultados obtenidos por tres técnicos en diferentes días. Resultados: Las condiciones de PCR para la amplificación del gen de interés fueron estable - cidas (94°C/4 min; 40 ciclos de 94°C/1 min, 56°C/1 min. y 72°C/1.5 min; 72°C/4 min); 1.5 mM MgCl 2 y 1 U/μL Ta q polimerasa. La sensibilidad analítica de la PCR fue de 10 -17 g de ADN , equivalentes a una copia del plásmido o menos de un cuerpo elemental de C. tracho - matis. Los cebadores CtP1 y CtP2 amplificaron específicamente el ADN de C. trachomatis bajo las condiciones experimentales evaluadas. La repetitibilidad y reproducibilidad de la PCR se determinó con experimentos de variabilidad intra e interensayo respectivamente. Conclusiones: La estandarización de esta PCR es el primer paso para su utilización en el diagnóstico de infecciones por C. trachomatis . Se requieren estudios adicionales de validación clínica de ésta prueba. |
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