Optimización de la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes
Para optimizar la eficiencia en la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes, secciones de zanahoria fueron inoculadas con la cepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadas con acetosiringona, floroglucinol y una combinación de ambos. La acetosiringona es uno de los compuestos fenólicos...
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| Autores principales: | , , |
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| Formato: | article |
| Lenguaje: | ES |
| Publicado: |
Universidad de Costa Rica
2003
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | https://doaj.org/article/e483a50cc4474e6a8b7a860eddf9b7a9 |
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| Sumario: | Para optimizar la eficiencia en la transformación
genética con Agrobacterium rhizogenes,
secciones de zanahoria fueron inoculadas con la
cepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadas
con acetosiringona, floroglucinol y una combinación
de ambos. La acetosiringona es uno de
los compuestos fenólicos que liberan los tejidos
vegetales como respuesta a heridas, el cual
induce la transferencia del T-ADN de la agrobacteria
a la planta. El floroglucinol es también un
compuesto fenólico; sin embargo, ejerce un efecto
sinergístico con las auxinas, inhibiendo parcialmente
la actividad de las citocininas. La
mayor eficiencia en la transformación (75%) se
obtuvo con el uso de acetosiringona (100 mM)
en combinación con floroglucinol (25 mg l-1). En
general, 6 días de co-cultivo, independientemente
de los tratamientos, fue el tiempo que
indujo el mayor porcentaje de transformación. La
inclusión de 100 mg l-1 de kanamicina resultó un
mecanismo eficiente para discriminar entre
raíces transformadas y no transformadas. En adición,
este trabajo presenta un novedoso sistema
con el cual, una vez realizada la transformación,
la bacteria puede ser eliminada completamente
en 48 h con Cefotaxime en dosis de 500 mg l-1. |
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